本发明涉及一种葡萄离体茎段的脱毒方法，包括如下步骤:1)选择继代培养至茎半木质化的葡萄品种或相关砧木的试管苗,无菌条件下剪取单芽茎段接种在培养基中,置于22- 28°C、2000- 30001x培养室培养至刚刚露出小白根,得到葡萄离体茎段;2)将葡萄离体茎段置于35-40°C的培养箱中，暗处理并同时进行热处理;3)热处理10d后开始观察侧芽生长情况,当黄化嫩梢长至6-10cm,在无菌条件下肉眼剥取0.2- 0.8mm左右的微茎尖,置于培养基中培养,直至得到繁殖材料。本发明既不要求光照,也不要求频繁变温处理,操作简单、省时、省电、省工,效率高、成本低,对研究环境及条件设施要求不十分严格,只要具备组培条件的研究及教学单位均可应用。

一种葡萄离体茎段的脱毒方法,包括如下步骤:1)选择继代培养至茎半木质化的葡萄品种或相关砧木的试管苗,无菌条件下剪取单芽茎段接种在培养基中，置于22-28*C、2000-30001x培养室培养至刚露出小白根,得到葡萄离体茎段;2)将葡萄离体茎段置于35-40°C的培养箱中,暗处理并同时进行热处理;3)热处理10d后开始观察侧芽生长情况，当黄化嫩梢长至6-10cm,在无菌条件下剥取0.2-0. 8mm左右的微茎尖,置于培养基中培养,直至得到繁殖材料。所述培养基是添加了0.1-0.5mg/LIAA, 15- -30mg/L蔗糖,以及4. 5-7.0mg/L琼脂或明胶,pH为5.8的改良B5培养基;其中

目前国内已报道葡萄病毒病主要有9种:扇叶病、卷叶病、茎痘病、栓皮病、斑点病、脉坏死病、耳突病、星状花叶病和缩叶病。其中,扇叶病与卷叶病是我国葡萄生产中分布最广、危害最严重的病毒病种类。据调查,目前我国葡萄栽培区域内,85%以上的葡萄园普遍发病，给葡萄生产带来了极大的损失。郭德银等采用间接ELISA法,随机检测了35个葡萄品种,带扇叶病毒率高达74.3%。何水涛等对国家葡萄种质资源圃(郑州)内39个品种共78株葡萄进行了PAS-ELISA检测，带毒率为76. 9%鉴于繁殖材料带病毒是葡萄病毒病的主要传播途径,因此,对葡萄繁殖材料进行病毒脱除,建立无病毒的葡萄原原种圃、母本园和苗圃等无病毒苗木的生产体系,以保证栽植材料健康无毒，是防治葡萄病毒病的关键。

河北省农林科学院昌黎果树研究所，是一个以应用技术研究为主的省级专业技术科研单位，主要开展苹果、梨、葡萄、桃、板栗、甜樱桃等树种的资源创新、遗传育种、优质丰产栽培技术、无公害病虫防治技术、果品保鲜技术等方面的研究与应用，为全省的果树产业发展提供技术支撑与服务。主要发展我省果树生产事业，不断提高果品产量和质量水平，主要从事果树科技领域的应用及理论的研究工作，推广普及科研成果和生产技术，技术咨询，承担果园的规划设计，生产指导，技术业务培训，技术资料编印，优种良苗的培育、提供，为当时当地生产服务。

本发明的有益效益

1)采用培养7d左右刚刚露出根原基、侧芽尚未萌发的半木质化茎段效果较好，腋芽萌发出的黄化嫩梢不会因突然高温而死掉，存活率高,处理1次便可获得一-批茎尖;2)此类材料对温度适应能力强，培养箱温度直接调到38C ;3)试管材料放于泡沫箱,既防止玻璃瓶内水分散失,又可形成黑暗处理,侧芽可快速萌发并生长;4)用于继代、生根及微茎尖生长的培养基均为一种,成份简单,通用性强;5)此方法既不要求光照，也不要求频繁变温处理,操作简单、省时、省电、省工,效率高、成本低,对研究环境及条件设施要求不十分严格,只要具备组培条件的研究及教学单位均可应用。

本技术具有较强的财务盈利能力，其财务净现值良好，投资回收期合理。综上所述，该技术属于国家鼓励支持的项目，技术的经济和社会效益客观，技术的投产将改善优化当地产业结构，实现高质量发展的目标。

技术转让，所需资金需双方协商，此项技术想尽快落地保定，希望具备此项技术研发的技术方，能够尽快承接次项目